ایمونولوژی عملی (سرولوژی)
آزمون سازگاری انتقال خون (کراس مچ)
(Cross match)
2
اولین شرط لازم قبل از انتقال خون:
یکسان بودن گروههای خونی ABO و Rh شخص دهنده و گیرنده خون
کراس مچ (Cross match)
شناسایی وجود یا عدم وجود آنتی بادیهای خارج از انتظار و با اهمیت بالینی در سرم فرد گیرنده علیه RBC های شخص دهنده
کراس مچ ماژور: سرم گیرنده خون + RBC دهنده
کراس مچ مینور: سرم دهنده خون + RBC گیرنده
انتقال خون
3
4
کراس مچ ماژور (Major cross match)
سرم شخص گیرنده
سوسپانسیون 5-3 درصد از گلبولهای قرمز دهنده (کیسه خون)
انجام آزمایش در سه فاز (3مرحله – 3 لوله)
مشاهده آگلوتیناسیون و یا همولیز در هر کدام از مراحل >> ناسازگاری خون
عدم مشاهده آگلوتیناسیون و یا همولیز در هر کدام از مراحل >> سازگاری خون
5
کراس مچ ماژور (Major cross match)
6
کراس مچ ماژور (Major cross match)
انجام آزمایش:
فاز سرما (دمای اتاق Room temperature)
فاز آلبومین (Albumin)
فاز کومبس (Coombs) یا آنتی هیومن گلوبولین (AHG)
7
روش انجام کراس مچ
سه عدد لوله را به صورتIDC , Alb , RT علامت گذاری کنید
RT برای تجسس آلو آنتی بادیهای سرد
Alb برای تجسس آلو آنتی بادی های گرم
IDCبرای تجسس آلو آنتی بادی های ناقص
داخل لوله RT ، یک قطره سرم بیمار بریزید
داخل لوله Alb ، 2 قطره سرم بیمار بریزید
داخل لوله IDC ، 2 قطره سرم بیمار بریزید
کلیه لوله ها را از نظر سرم بیمار کنترل کنید
به هر یک از لوله ها یک قطره از سوسپانسیون 3 تا 5 درصد گلبول قرمز دهنده اضافه کنید
8
روش انجام کراس مچ
لوله RT را یک ساعت در حرارت اتاق قرار دهید
لوله IDC را یک ساعت در بن ماری با دمای 37 درجه سانتی گراد قرار دهید .
لوله Alb را به مدت نیم ساعت در بن ماری 37 درجه سانتی گراد قرار دهید ، پس از گذشت نیم ساعت از کنار لوله به آرامی یک قطره آلبومین گاوی 22درصد اضافه کنید (بدون مخلوط کردن) سپس نیم ساعت دیگر در بن ماری باقی بماند.
پس از اتمام یک ساعت لوله های RT و Alb را به آرامی تکان داده و از نظر همولیز یا آگلوتیناسیون بررسی کنید .
پس از یک ساعت لوله IDC را از بن ماری بیرون آورده و 3 بار با سرم فیزیولوژی شستشو داده ، پس از آخرین شستشو و خالی کردن سرم فیزیولوژی لوله IDC را روی یک دستمال برگردانید تا تمام سرم خارج شود و گلبولهای قرمز کاملاً خشک شوند
9
روش انجام کراس مچ
در مرحله آخر یک قطره آنتی هیومن گلبولین داخل لوله IDC ریخته و کاملاً مخلوط کنید ، سپس لوله IDC را بمدت 30 ثانیه در سروفیوژ سانتریفوژ کنید .
لوله IDC را از سانتریفوژ خارج کنید و به آرامی تکان دهید لوله را در مقابل روشنایی از نظر آگلوتیناسیون بررسی کنید . در همه موارد ، نتایج منفی باید از نظر میکروسکوپی چک شوند .
نکته : برای تایید نتیجه منفی لوله IDC می توان از گلبول قرمز حساس شده استفاده نمود
10
تفسیر نتایج آزمایش کراس مچ
در سرم فرد گیرنده
حضور آنتی بادیهای سرد
از کلاس IgM
علیه آنتی ژنهای گروههای خونی ABO, Lewiss, P, M, N
در سرم فرد گیرنده
حضور آنتی بادیهای گرم
از کلاس IgG
علیه آنتی ژنهای گروههای خونی مانند Rh
در سرم فرد گیرنده
حضور آنتی بادیهای ناکامل
از کلاس IgG و IgA
11
"آینده" مکانی نیست که به آنجا می رویم،
جاییست که آن را به وجود می آوریم