پاورپوینت روش های نوین ارزیابی آلرژی در خون


روش های ارزیابی حساسیت و آلرژی در خون

آلرژی
آلرژی (واکنش آلرژیک) وقتی اتفاق می افتد که سیستم ایمنی بدن اشتباها عوامل بی ضرر محیطی را بعنوان عوامل مضر و خطرناک شناسایی می کند و تولید آنتی بادی بنام IgE می کند.
اجتناب از تماس با آلرژن مهمترین راه کنترل آلرژی محسوب می شود. البته در اغلب موارد این اجتناب به طور کامل امکانپذیر نبوده و پزشکان ناچار به استفاده از داروهای مختلف جهت کنترل آلرژی می شوند.
اما باید به خاطر داشت که پرهیز کامل تنها راه جلوگیری از واکنش آلرژیک می باشد.

مکانیسم آلرژِی

تشخیص آلرژی
امروزه بیماری های آلرژیک به مهمترین علل مراجعه بیماران به پزشک تبدیل شده است ، به همین جهت عده ای از محققین جهان دائما در حال ابداع روش هایی هستند تا تشخیص آسانتر شود زیرا شناسایی ماده حساسیت زا مهمترین مرحله برای درمان آلرژی است.
بیماری های آلرژیک را می توان از علایم باینی ، تست های آلرژیک پوستی و انجام ازمایشات خون ( سلول های خون –Ig E ) تشخیص داد.

تشخیص آلرژی ( تست های پوستی)
تست های پوستی فوری :
این دسته تست هاس پوستی بیشتر برای تشخیص آلرژی نوع فوری نسبت به دارو ها و آلرژن هایی که در محیط اطراف پراکنده اند (آلرژی آتوپیک ) مانند دانه های گرده و یا غذا ها انجام می گیرد . این دسته تست های پوستی بر حسب نوع کلاس آنتی بادی بین چند دقیقه تا چند ساعت پس از تزریق آنتی ژن در پوست فرد حساس ، به حداکثر می رسد .
مثال : تست پریک ( prick skin test )

تشخیص آلرژی ( تست های خونی)
در تست های خونی آلرژی حضور انتی بادی از کلاس IgE در سرم بیمار اندازه گیری می شود روش های رایج برای انداژه گیری شامل Immunblot ، ELISA ، ImmunoCAP میباشد که در این روش ها آنتی بادی IgE اختصاصی بر علیه هر آلرژن را می توان جست و جو نمود .
همچنین در بعضی از موارد میزان آزادسازی هیستامین از بازوفیل ها نیز سنجش می شود
.
مزایای تست غربالگری آلرژی از طریق آزمایش خون نسبت به سایر روش ها:
با یک خونگیری ساده قابل انجام است و نیازی به تزریقات مکرر پوستی و مراجعات بعدی برای پیگیری واکنش بدن نسبت به آنها نیست.
سهولت انجام تست برای نوزادان و کودکان
عدم ایجاد واکنش های آنافیلاکسی در افراد پر خطر
حساسیت و ویژگی بالا
قیمت بسیار مناسب در مقایسه با سایر روش های موجود بخصوص تست پوستی
تشخیص سریع نوع آلرژن در عرض 4 ساعت

معرفی تست RAST (radioallergosorbenttest)
RAST از تستهای آزمایشگاهی می باشند که برای تشخیص آنتی بادی های IgEسرم به کار می روند
می توان از RAST در مورد شناسائی مایت ها ، آلرژن های سگ و گربه ، گرده علف ها ، گرده درختان ، هرزه علف ها و کپک ها استفاده کرد .
تست RAST برای اولین بار در سال 1970 شناخته شد و در سال 1989 به عنوان یک تست برتر در واکنشهای آلرژیک جایگزین شد.برتری این دست جدید به این علت ها بود:
 بهبود حساسیت تست بدون کاهش اختصاصیت
 همچنین این تست نسبت به تست های پوستی نقطه ای یک برتری اصلی داشت واین بود که دیگر لازم نبود که بیماری که از میانجی گرهای آنتی هیستامینی استفاده می کرده مدتی آنها را قطع کند و همچنین در مواردی که شخص دچار ضایعات پوستی مثل اگزما بود دیگر محدودیتی در استفاده از این تست ها نبود.

روش کار

The RAST is scored on a scale from 0 to 6:

موارد ارجحیت RAST به تست های پوستی:
در صورت وجود یک ممانعت کننده فیزیکی که منجر به بروز تداخل در تست ها ی پوستی یا عوارض پزشکی می شود
وجود آسیب های پوستی مانند اگزما که مانع از انجام تست به طور وسیع در روی پوست شود
  بیماری، که دارای سطح بالایی از حساسیت باشد که با هرگونه تحریک امکان ایجاد عوارض جانبی در وی می باشد

معرفی تست Immuno CAP
روش Immuno CAP نسل چهارم روشRASTمی باشد که قابلیت اندازه گیریIgEاختصاصی 650آلرژن را دارد و از طرف WHO به عنوان روش استاندارد طلائی (Gold Standard) تست های آزمایشگاهی (In vitro) برای آلرژی معرفی شده است.
فاز جامد : مشتق سلولز

روش کار
عکس دستگاه

Test Interpretation and Management Options
Utilizing the ImmunoCAP® KU/L Score

Phadia Laboratory Systems
Angela Gore1 (angela.gore@thermofisher.com)
Gareth Evans2
Mats Rilvën2

ImmunoCAP ISAC
روش ISAC Microarray Immuno CAP جدیدترین تکنولوژی ارائه شده برای آلرژی کودکان می باشد که بر اساس تکنولوژی بیوچیپ (بیوسنسورهای منفرد است که می توانند به صورت جداگانه عمل کرده و عموما برای تشخیص همزمان چندین آنالیت بکار می رود. ) طراحی شده و توانایی اندازه گیری میزانIgEاختصاصی 112 اپی توپ مختلف از 51 آلرژی شایع را تنها با 30 میکرولیتر از خون کودک دارد.
Immuno Solid-phase Allergen Chip (ISAC)

روش انجام

خلاصه :

سنجش آزاد سازی هیستامین
هیستامین ( بتا امیدازول اتیلن آمین ) یکی از مهم ترین مدیاتور های بدن است که از دکربوکسیلاسیون هیستدین در سلول ها سنتز می شود و در گرانول های سلول های بازوفیل و ماست سل ها ذخیره می شود . و درهنگام واکنش های التهابی و آلرژیک به داخل خون آزاد می شود .
سنجش آزاد سازی هیستامین از بازوفیل ها یکی از روش های تسخیص آلرژی می باشد . به این شکل که در هنگام واکنش آلرژیک در مرحله حساس شدن آنتی بادی IgE که توسط لنفوسیت های B تولید شده به FcεR روی سطح ماست سل ها و بازوفیل ها متصل می شوند و در مرحله بعد هنگامی که آلرژن برای بار دوم وارد بدن می شود با اتصال به انتی بادی های سطح این سلول ها باعث تحریک آن ها شده باعث دگرانوله شدن گرانول های حاوی هستامین به داخل خون می شود که متعاقب آن علایم التهاب و آلرژی در فرد ظاهر می شود .
در آزمایشگاه خون کامل هپارینه فرد آتوپیک را با آلژن های مورد نظر برای مدتی انکوبه می کنند که در طی انکوباسیون آلرژن به سطح بازوفیل های موجود در خون متصل شده و باعث آزاد سازی هیستامین می شود که در مراحل بعد به کمک روش های ایمونواسی هیستامین آزاد شده به صورت کمی سنجش می شود

سنجش آزاد سازی هیستامین
بیمار 24 ساعت قبل از نمونه گیری باید از مصرف داروهای ضد آلرژی ، آنتی هیستامین ها و کورتیکواستروئید ها خودداری کند

آزاد سازی هیستامین به شکل درصد گزارش می شود ، که برای این کار نیاز به توتال هیستامین داریم ،
که برای اینکار ما به وسیله یونومایسین (Ionomycin) ابتدا سلول ها را لیز کرده و سپس میزان هیستامین موجود را اندازه می گیریم

اصول سنجش هیستامین به روش HTRF

سنجش هیستامین به روش HTRF یک روش سنجش ایمونورقابتی است که با استفاده از هیستامین لیبل شده با XL665 و آنتی هیستامین لیبل شده با کریپتات انجام می شود .
رنج نرمال هیستامین : کمتر از 16%